Lecture Du Milieu Hugh &Amp; Leifson - Fiche De Lecture - Calme86 / Horaire Déchetterie Saint Berthevin

Résumé du document Le métabolisme glucidique correspond à l'ensemble des réactions, qui font intervenir les glucides en tant que substrats. Un glucide est une molécule organique composée d'atomes de C, H et O. Il comporte une fonction aldéhyde ou une fonction cétone. Il existe plusieurs sortes de glucides (... ) Sommaire I) Qu'est-ce qu'un glucide? II) Métabolisme des glucides: mise en évidence de l'utilisation des glucides III) Voie d'attaque des glucides A. Définitions B. Milieux d'étude de la voie d'attaque des glucides: les MEVAG IV) Mise en évidence de l'utilisation d'un glucide par acidification A. Principe de l'étude B. Exemples de milieux C. Milieu de base liquide: eau peptonée + glucide + indicateur de pH D. Milieux solides: milieux d'isolement E. Milieux complexes V) Etude de la fermentation d'un glucide VI) Autres tests de mise en évidence d'un glucide A. Mise en évidence de la disparition d'un polyholoside B. Mise en évidence de l'apparition d'un produit: l'esculétine C. Lecture du milieu Hugh & Leifson - Fiche de lecture - Calme86. Mise en évidence de la présence d'enzyme intervenant dans le métabolisme glucidique Extraits [... ] Le métabolisme glucidique Qu'est-ce qu'un glucide?

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β-galactosidase Lactose glucose + galactose La recherche de cette enzyme ne se fait qu'à partir d'un milieu lactosé (exemple: milieu Kligler-Hajna). En effet, l'enzyme n'est synthétisée qu'en présence de lactose dans le milieu (enzyme inductible). La recherche ne présente d'intérêt que dans le cas de bactéries lactose En effet, toutes les bactéries lactose+ sont β-galactosidase la recherche de l'enzyme est donc inutile. On utilise pour sa recherche un substrat synthétique, l'ONPG ortho-nitro-phénylgalactoside). VI-4- Mise en évidence de l'assimilation d'un substrat carboné Exemple: milieu Citrate de Simmons. ] Cette recherche s'effectue à partir du milieu Clark et Lubs. VI- Autres tests de mise en évidence d'un glucide VI-1- Mise en évidence de la disparition d'un polyholoside Exemple: la dégradation de l'amidon est recherchée sur milieu gélosé à l'amidon. L'attaque de l'amidon est mise en évidence par la disparition de la coloration caractéristique dans la gélose. VI-2- Mise en évidence de l'apparition d'un produit: l'esculétine L'esculine est un hétéroside qui par hydrolyse libère du glucose utilisé par les bactéries et de l'esculétine qui donne un précipité noie en présence de fer. Voie d attaque du glucose. ]

- souche 2: observation de bactéries polymorphes, certaines sous forme de bâtonnets très courts, d'autres presques ovalaires, roses avec coloration bipolaire, se déplaçant lentement de façon sinueuse. Interpréter les observations faites pour chacun des souches testées 2. Lecture de l'isolement réalisé sur GNO (ou GTS pour Gélose Trpypticase Soja soit TSA pour Trypticase Soy agar en anglais) milieu non sélectif sur lequel l'isolement est réalisé en dernier en jour 1) Conditions d'incubation: 36 h, 37 °C L'isoelement a-t-il été correctement réalisé? Le métabolisme glucidique des bactéries. Rappel: isoler consiste à séparer les micro-organismes à la surface d'un milieu nutritif gélifié, de manière à ce que, après culture, on obtienne des colonies bien distinctes L'isolement permet-il de valider la pureté de la suspension préparée en jour 1? Observer minutieusement... Rappels: - si oui, la galerie d'orientation est validée et interprétable - si non, les résultats de la galerie ne sont pas interprétables (et donnés sous réserver, le temps de refaire la manipulation) Quelles caractères culturaux peut-on indiquer?

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Cette technique permet la détermination du métabolisme oxydation ou fermentatif de la bactérie, autrement dit: dégrade-t-elle le glucose via le cycle de Krebs ou utilise-t-elle une autre voie? Principe [ modifier | modifier le code] Dans le milieu Hugh et Leifson auquel on ajoute du glucose, on cherche le métabolisme de la bactérie. Le milieu est régénéré (il a été maintenu en surfusion pour que les gaz dissous dans le milieu s'en échappent). Il possède donc un gradient de concentration en dioxygène (l'O 2 est plus abondant en surface qu'en profondeur). Les bactéries qui utilisent le glucose produisent des acides. La visualisation des productions d'acide est indiquée par le changement de couleur du bleu de bromothymol, indicateur coloré de pH contenu dans le milieu. Voie d attaque du glucose en. À la fin de l'incubation, on observe le changement de couleur du milieu pour déterminer le type oxydatif ou fermentatif. Composition du milieu de Hugh et Leifson [ modifier | modifier le code]:→voir Hugh et Leifson Attention: c'est après la régénération qu'il faut ajouter une solution de glucose à 10.

Les bactéries sont oxydatives. 3 Tubes O et F entièrement jaunes → il y a eu virage de l'indicateur coloré à cause de la production d'acide dans tout le tube: les bactéries ont utilisé le glucose en présence et en absence d'oxygène. Les bactéries sont donc fermentatives. 4 Haut du tube O bleu → bactéries inertes au glucose: utilisation des peptides comme source d'énergie. RECHERCHE DE LA VOIE D ATTAQUE DU GLUCOSE : définition de RECHERCHE DE LA VOIE D ATTAQUE DU GLUCOSE et synonymes de RECHERCHE DE LA VOIE D ATTAQUE DU GLUCOSE (français). Précisions Le type oxydatif ou fermentatif est étroitement lié avec le type respiratoire de la bactérie. On peut donc vérifier la cohérence des résultats avec le milieu viande-foie. Voir aussi Recherche du type respiratoire Portail de la biologie

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Régénérer à 100°C pendant 30 minutes en dévissant un petit peu le bouchon pour laisser l'air s'échapper. Laisser refroidir le milieu jusqu'à ce qu'il durcisse (par exemple, gagner du temps avec un robinet d'eau froide). Utiliser une pipette pasteur fermée pour ensemencer le tube à essai en fessant une piqure centrale profonde. Viser partiellement le bouchon du tube pour laisser l'oxygène pénétrer dans le tube à essai. Incuber à 37°C pendant 24 heures à 48 heures. Voie d attaque du glucose est. Lecture, interprétation [pic 1] On observe aucun changement avant et après ensemencement donc on peut conclure que la souche de bactérie étudiée est inerte vis-à-vis du glucose. Le pH du milieu reste vert donc a un pH neutre (environ 7).

La souche inconnue est comparée à des espèces déjà décrites (souches-types) et le nom de l'espèce la plus similaire est proposé. Souche: c'est une population d'organismes descendant d'un organisme unique ou d'un isolat de culture pure. Au sein d'une même espèce les souches peuvent présenter des différences légères entre elles qui pourront être caractérisées sur la base: de leurs propriétés biochimiques ou physiologiques pour les biovars; de leurs propriétés antigéniques pour les sérovars; de leur facteur de virulence pour les pathovars. 4 ème partie: plan d'étude de la procédure opératoire d'orientation A partir des indications apportées dans le support d'activité (fiches techniques, chronologie des opérations), un plan d'étude est réalisé afin - de bien visualiser l'ensemble des instruments et milieux à mettre en place sur la paillasse - de ne pas perdre de temps 5 ème partie: lecture des tests effectués 1. Observations microscopiques Résultats obtenus: - souche 1: observation de bâtonnets roses, se déplaçant rapidement.

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